蛋白质定量法虽然很多,但至今仍将19世纪末丹麦化学家凯道尔kjdidahi发现的凯氏定氮法作为法定的标准方法。
在众多测定方法中,因为凯氏定氮法校准方法方便、快捷、准确。在各种定量法中仍占中心地位,当报道一种新方法时,通常是将新法测定的结果同凯氏法相比较,并探讨其相关性。凯氏定氮法又根据仪器装置、样品与试剂用量的不同分为常量、半微量与微量法。其中半微量凯氏定氮法是食品中蛋白质含量测定的国家标准方法(参见GB5009· 5-85)。
凯氏定氮法是测定化合物或混合物中总氮量的一种方法。即在有催化剂的条件下,用浓硫酸消化样品将有机氮都转变成无机铵盐,然后在碱性条件下将铵盐转化为氨,随水蒸气蒸馏出来并为过量的硼酸液吸收,再以标准盐酸滴定,就可计算出样品中的氮量。由于蛋白质含氮量比较恒定,可由其氮量计算蛋白质含量,故此法是经典的蛋白质定量方法。
样品蛋白质含量(%)=总氮量x6.25
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